الطرق الميكروبيولوجية لدراسة المياه والتربة والهواء

الكائنات الدقيقة - صغيرة، المخلوقات معظمها وحيدة الخلية، والتي هي على نطاق واسع في الطبيعة. وهي توجد في جميع وسائل الإعلام (الهواء والتربة والماء) في البشر والحيوانات، في النباتات.

التنوع النوعي وعدد من الكائنات الحية يعتمد في المقام الأول على مركبات غذائية. ولكن من المهم كما الرطوبة ودرجة الحرارة والتهوية وعمل أشعة الشمس وعوامل أخرى أيضا.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. طرق لوسائل الإعلام الطبيعي الصحي والدراسات الميكروبيولوجية يمكن الكشف عن وجود مسببات الأمراض وتحديد قيمتها وفقا للنتائج التي تم الحصول عليها، إلى وضع تدابير لإزالة أو منع الأمراض المعدية. وبالإضافة إلى ذلك، هناك حاجة إلى حساب الكمي لنمذجة النظم الإيكولوجية وتطوير العمليات الطبيعية للحكم. . دعونا ننظر أبعد ما هي طرق الفحص الميكروبيولوجي.

تربة

وينظر إليه من قبل العلماء باعتبارها واحدة من طرق محتملة لانتقال الأمراض المعدية. مع إفرازات المريض للإنسان أو الحيوان في مسببات التربة اختراق. بعض منهم، ولا سيما، بوغ، يمكن أن تستمر في التربة لفترة طويلة (في بعض الأحيان لعدة عقود). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). مسببات الأمراض سقوط التربة هذه الأمراض الخطيرة مثل الكزاز، والجمرة الخبيثة، التسمم الغذائي، وهكذا دواليك. طرق دراسة صحية، علم الأحياء الدقيقة في التربة تسمح لك لتحديد "العد الميكروبي" (عدد من الكائنات الحية الدقيقة في التربة من الجرام)، ومؤشر القولونية (عدد كولاي) .

تحليل التربة: لمحة عامة

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. طرق الفحص الميكروبيولوجي للتربة يجب أن يعزى في المقام الأول المجهري والثقافة مباشر على الصلب وسط غذائي. تختلف السكان من الكائنات الحية الدقيقة ومجموعاتهم التي تعيش في التربة، عن حالة التصنيف والوظائف الإيكولوجية. في العلم، وكانوا متحدين تحت مصطلح عام "الكائنات الحية في التربة." التمهيدي - موطن عدد كبير من الكائنات الحية الدقيقة. في غرام من التربة موجود 1-10 مليار دولار من زنازينهم. في هذه البيئة، ويأخذ بنشاط تحلل المواد العضوية، وبمشاركة العديد من الكائنات الحية الدقيقة بالارتمام.

الدراسات المجهرية من طريقة الميكروبيولوجي: الخطوات

تحليل المتوسطة يبدأ مع أخذ العينات. لهذا الغرض، مقشر سابقا والمبشور الكحول سكين (مجرفة يمكن استخدامها). بعد ذلك، وإعداد العينات. الخطوة التالية - عد الخلايا مسحات الملون. النظر في كل خطوة على حدة.

أخذ العينات

في تحليل التربة الزراعية تميل العينة المأخوذة من عمق طبقة بأكملها. إزالة أولا 2-3 سم فوق سطح الأرض، لأنها قد تكون موجودة في البكتيريا الدخيلة. بعد ذلك، مع مساحة الأرض درست اتخاذ كتل. ويبلغ طول كل واحد منهم يجب أن تتوافق مع سمك الطبقة التي تريد لعينة.

على قطعة من 100-200 متر مربع. 7-10 م عينات مختارة. وزن كل - من أجل من 0.5 كجم. العينات يجب أن تكون مختلطة تماما في الحقيبة. ثم أخذ متوسط عينة تزن حوالي 1 كجم. وينبغي أن توضع في الرق (العقيمة) حزمة المغلقة في كيس من القماش. قبل توجيه تحليل العينة المخزنة في الثلاجة.

إعداد مسح

تدفقت التربة أثار على الزجاج الجاف. ما قبل القضاء مع الكحول وحرق فوق الموقد. مع التربة ملعقة خلطا جيدا وتوسيع بالتساوي. وهي ملزمة لإزالة الجذور وعناصر أجنبية أخرى. للقيام بذلك، استخدم الملقط. قبل ملاقط التشغيل وملعقة فوق الموقد أشعلت وتترك لتبرد.

من المؤامرات المختلفة التربة موزعة على الزجاج، واختيار أجزاء صغيرة. أنها وزنه في صحن الخزف على نطاق والتقني. является специальная обработка образца. إلزامية خطوة طريقة المجهري للدراسات ميكروبيولوجية هو معالجة خاصة من العينة. 2 يجب أن تكون معدة مسبقا، وقارورة معقمة. يجب أن لا يتجاوز حجمها 250 مل. يسكب احدة من قوارير إلى 100 مل من ماء الصنبور. لأنه يأخذ 0.4-0.8 مل عينة السائلة وترطيبها إلى عجينة. يجب أن يفرك الخليط مع إصبع أو المطاط مدقة لمدة 5 دقائق.

تم نقل المياه من القارورة الأولى في كتلة التربة قارورة فارغة. وعلاوة على ذلك، وفرك ظهرها. بعد نقل هذه الكتلة إلى قارورة بالقرب من لهب الموقد. اهتزت حاوية مع تعليق التربة على شاكر لمدة 5 دقائق. بعد ذلك، سمح لها تسوية لحوالي 30 ثانية. وهذا أمر ضروري من أجل السماح الجزيئات الكبيرة إلى تسوية. بعد استخدام نصف كتلة دقيقة لإعداد التحضير.

عدد الخلايا في مسحات الثابتة

, разработанному Виноградским. ويتم دراسة مجهرية مباشرة من التربة بها أسلوب الدراسات الميكروبيولوجية، وضعت Vinogradskii. في حجم معين من تعليق تم فرز عدد من خلايا الكائنات الحية الدقيقة. يمكن دراسة مسحات الثابتة تخزين المخدرات على المدى الطويل وإجراء عمليات حسابية في أي وقت.

إعداد الدواء على النحو التالي. يتم تطبيق كمية معينة من الطين (عادة 0،02-0،05 مل) مع micropipette على الشريحة. لتمت إضافة هذا الحل قطرة من أجار أجار (السكاريد agaropectin الخليط واستخراج الاغاروز من البني والأحمر الطحالب البحر الأسود)، أثار بسرعة وتمتد على مساحة 4-6 متر مربع. سم. المجففة الهواء عنق الرحم والثابتة لمدة 20-30 دقيقة. الكحول (96٪). المقبل، والمخدرات مبلل بالماء المقطر وضعت في ص ف مشبع بحمض الكربوليك erythrosine 20-30 دقيقة.

بعد التلوين، وغسلها وتجفيفها في الهواء. عدد خلايا أداء من عدسة الغمر.

زرع على وسائل الاعلام الصلبة

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. طرق المجهرية للفحص الميكروبيولوجي يمكن الكشف عن عدد كبير من الكائنات الحية الدقيقة. ولكن على الرغم من هذا، وطريقة التلقيح هو الأكثر شيوعا في الممارسة العملية. يتكون جوهرها في بذر كمية من المخدرات (تعليق التربة) في طبق بتري في وسط صلب.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. هذا الأسلوب من الأبحاث الميكروبيولوجية يأخذ بعين الاعتبار ليس فقط الكمية ولكن أيضا المجموعة، وفي بعض الحالات، وتكوين الأنواع من النباتات المجهرية. عد عدد من المستعمرات المنتجة، وعادة من الجزء السفلي من طبق بيتري في ضوء المنقولة. على المنطقة المحسوبة وضع علامة أو الحبر نقطة.

تحليل المياه

النباتات الدقيقة من الجسم الماء، كقاعدة عامة، يعكس تكوين الميكروبي للتربة المحيطة بها. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. وفي هذا السياق، طرق التحليل الصحية، والميكروبيولوجية للمياه والتربة ذات أهمية عملية بالغة في دراسة حالة نظام بيئي معين. يحتوي على المياه العذبة، وكقاعدة عامة، المكورات، والبكتيريا على شكل قضيب.

اللاهوائية في الماء وجدت بكميات صغيرة. وكقاعدة عامة، تتكاثر في الجزء السفلي من المسطحات المائية، في الوحل، يشاركون في عملية التنقية. المحيطات والبحار البكتيريا مثلت مفيد الملحية (المحبة للملوحة) البكتيريا.

في المياه والآبار الارتوازية هي عمليا أي الكائنات الحية الدقيقة. ويرجع ذلك إلى قدرة تصفية طبقة التربة هذه.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. تعتبر الطرق التقليدية للبحوث المياه الميكروبيولوجي تعريف المؤشر إذا الجراثيم القولونية و-عيار أو. ويحدد المؤشر الأول على عدد من البكتيريا في السائل 1 مل. يمثل مؤشر القولونية عدد القولونيات الحالية في لتر من الماء، وإذا عيار - الحد الأدنى لعدد أو الحد الأقصى سائل التخفيف التي يمكن من خلالها لا يزال يتم الكشف.

تحديد عدد الميكروبي

هذه الطريقة الصحية الفحص الميكروبيولوجية للمياه هو على النحو التالي. في 1 مل من الماء يتم تحديد عدد اللاهوائية متوسطة الحرارة والاختيارية (الوسيطة) الجرام aerobes قادرة على على اللحوم الببتون أجار (وسط الأساسي) في 37 درجة. خلال اليوم لتشكيل المستعمرات مرئية في التكبير من 2-5 ص. أو بالعين المجردة.

является посев. يزرع الخطوة الأساسية لطريقة التحليل الميكروبيولوجي للمياه. لأن يزرع كل عينة على الأقل 2 أحجام مختلفة. عندما يتم تحليل مياه الصنبور في كل كوب من 1-0،1 مل من السائل النقي والملوثة 0،01-0،001 مل. لتلقيح 0.1 مل أو حجم أصغر من السوائل والمخفف بالماء المقطر (عقيمة). باستمرار إعداد التخفيفات العشرية. يرصد 1 مل من كل واحد منهم في اثنين من أطباق بتري.

تربية مليئة الآجار المغذي. يجب أن تذوب أولا، وبارد إلى 45 درجة. بعد اثارة، ويترك وسيلة نشطة على سطح أفقي للتصلب. في 37 درجة. وتزرع المحاصيل على مدار اليوم. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. الطريقة تعتبر من أبحاث الماء الميكروبيولوجي يأخذ بعين الاعتبار نتائج تلك الأطباق حيث بلغ عدد المستعمرات في حدود 30-300.

هواء

فهو يعتبر الأرض عبور للالكائنات الحية الدقيقة. являются седиментация (оседание) и аспирация. الطرق الرئيسية من الدراسات الميكروبيولوجية هي الترسيب الهواء (تسوية) والطموح.

وتنقسم بيئة الهواء البكتيريا بشكل تعسفي في متغير وثابت. وتضم المجموعة الأولى الخميرة، المكورات مولد اللون، بوغ الحاملة عصية القولونية والكائنات الدقيقة الأخرى التي تقاوم الجفاف، والتعرض للضوء. النواب ميكروبات متغيرة، اختراق في الهواء من بيئتها المعتادة، في الحفاظ على حيويتها طويلة.

في هواء المدن الكبيرة الكائنات الدقيقة أكثر من ذلك بكثير مما كانت عليه في بيئة الهواء في المناطق الريفية. عبر البحار والغابات وعدد قليل جدا من البكتيريا. تنقية الهواء تسهل هطول الأمطار: الثلوج والأمطار. الميكروبات في الداخل أكثر من ذلك بكثير مما كانت عليه في المساحات المفتوحة. ويزداد عددهم في فصل الشتاء في حالة عدم وجود التهوية العادية.

ترسيب

считается простейшим. ويعتبر هذا الأسلوب من الأبحاث الميكروبيولوجية في علم الأحياء المجهرية أن يكون أبسط. لأنه يقوم على تسوية من قطرات وجزيئات على سطح أجار في طبق بيتري المفتوحة تحت الجاذبية. طريقة الترسيب قد لا تحدد بدقة عدد من البكتيريا في الهواء. والحقيقة هي أن في كأس مفتوحة للقبض على جزء جيد من جزيئات الغبار وقطرات من بكتيريا صعبة للغاية. على سطح الاحتفاظ الجزيئات الكبيرة في المقام الأول.

لا يتم استخدام هذه الطريقة لتحليل الهواء. هذه البيئة التي تتسم بتقلبات كبيرة في سرعة تدفق الهواء. الترسيب قد، ومع ذلك، يمكن استخدامها في حالة عدم وجود أجهزة أكثر تطورا أو مصدر الطاقة الكهربائية.

تحديد عدد الميكروبية التي يقوم بها طريقة Omelyansky. بناء عليه، لمدة 5 دقائق على مساحة 100 أجار مربع. سم يستقر عدد من البكتيريا موجود في 10 لترا من الهواء.

طلب 535 "على توحيد الأساليب الميكروبيولوجية للتحقيق"

التحليل البكتريولوجي تحتل مكانا هاما في أنشطة السريرية والمخبرية المعقدة التي تهدف إلى التشخيص والوقاية والعلاج من الأمراض المعدية المختلفة. ومع ذلك، فإن دراسة البيئة، فهي ليست محدودة.

أهمية خاصة هو التحليل البكتريولوجي من المواد البيولوجية في المستشفيات. لالأبحاث التي أجريت في المرافق الصحية، وزيادة المتطلبات. والغرض من هذا النظام "على توحيد الأساليب الميكروبيولوجية للتحقيق" هو تحسين التحليل البكتريولوجي، وتحسين نوعية وكفاءة التشخيص الميكروبيولوجية.

الفحص المجهري للطخات في النساء

وهي طريقة أساسية للتحليل لتشخيص الأمراض، والأمراض المنقولة جنسيا، والعدوى الانتهازية (البكتيريا الانتهازية).

التحليل المجهري لتقييم التركيب النوعي والكمي للميكروبات، والتحقق من صحة أخذ العينات. على سبيل المثال، وجود ظهارة المهبل في مسحات تؤخذ من قناة عنق الرحم يشير إلى وجود انتهاك لقواعد اختيار عينة بيولوجية.

يشار الى ان الفحص الميكروبيولوجي في هذه الحالة يتبع عادة من قبل بعض المشاكل. وتتعلق هذه إلى حقيقة أن في الجهاز التناسلي السفلي وتقديم عادة البكتيريا المتنوعة التي تختلف في أعمار مختلفة. لتحسين كفاءة البحوث ووضعت قواعد موحدة.

تشخيص العدوى الفيروسية

ويتم ذلك عن طريق وسائل الكشف عن الحمض النووي الريبي DNA ومسببات الأمراض. وهي تستند في المقام الأول على تحديد تسلسل النوكليوتيدات في المواد المرضية. لهذا الغرض، تحقيقات الجزيئية. يتم إنتاجها صناعيا الأحماض النووية مكملة ل(مكملة ل) الأحماض الفيروسية المسمى مع تسمية المشعة أو البيوتين.

ويتكرر خصوصية طريقة نسخ جزء DNA محددة تحتوي على عدد قليل من مئات (أو عشرات) NUCLEOTIDE أزواج. التكرار (النسخ) هو أن التمديد قد تبدأ فقط في وحدات معينة. الاشعال (الاشعال) تستخدم لخلق لهم. هم أليغنوكليوتيد] توليفها.

PCR التشخيص (البلمرة سلسلة من ردود الفعل) هو بسيط في التنفيذ. هذا الأسلوب يسمح لك بسرعة للحصول على النتيجة باستخدام كمية صغيرة من المواد المرضية. باستخدام PCR التشخيص يحدد الحادة والمزمنة و(الخفية) العدوى الكامنة.

حين ينظر في حساسية هذه الطريقة أكثر من الأفضل. ومع ذلك، فإن أنظمة الاختبار الحالية ليست موثوقة بما فيه الكفاية، وبالتالي فإن التشخيص PCR لا يمكن أن تحل تماما محل الطرق التقليدية.